उद्देश्य

जैविक पदार्थ सतह पर कोशिकाओं के प्रसार के साइटोस्केलेटन की छवि बनाना

परिचय

हमारा शोध समूह कठोर ऊतक (हड्डी) के प्रतिस्थापन के लिए जैविक पदार्थ के निर्माण और रचना पर केंद्रित है। इन जैविक पदार्थ की जैविक अनुकूलता का परीक्षण जैविक पदार्थ पर सेल कल्चर अभ्यासक्रम (आसंजन, वृद्धि और प्रसार) करके किया जाता है। कोशिका आकृति विज्ञान की जांच प्रतिदीप्ति खुर्दबीन तकनीक का उपयोग करके की जाती है। यहां, इस प्रयोग में, कोशिकाओं के साइटोस्केलेटन की छवि के लिए एक विशिष्ट डाई या एक फ्लोरोफोर का उपयोग करके की जाती है जो साइटोस्केलेटन के एक्टिन सबयूनिट्स से जुड़ती है और फिर प्रतिदीप्ति खुर्दबीन के तहत हरे रंग का प्रतिदीप्त करती है।

क्रियाविधि

(१) प्रतिदर्श को साफ और कीटाणुरहित करें।
(२) वांछित अवधि के लिए प्रतिदर्श पर कोशिका पालन या अन्य प्रयोग करें ।
(३) कोशिका पालन के मामले में कोशिकाओं की गति को रोकने के लिए प्रतिदर्श को निर्जलित करें।
(४) ग्लूटाराल्डिहाइड का उपयोग करके प्रतिदर्श को ठीक करें।
(५) पीबीएस में धो लें।
(६) इसे ट्राइटन से उपचारित करें और फिर पीबीएस में धो लें।
(७) प्रतिदर्श को फैलोलाइडिन डाई से उपचारित करें।
(८) उपयुक्त फिल्टर को ऑप्टिकल अक्ष में रखें और पारा-वाष्प लैंप चालू करें।
(९) उत्तेजना प्रकाश की तीव्रता को समायोजित करें।
(१०) प्रतिदर्श को प्रतिदीप्ति खुर्दबीन के नीचे रखें।
(११) प्रतिदर्श के साइटोस्केलेटन को देखने के लिए खुर्दबीन के शीशा का उपयोग करके वांछित क्षेत्र पर ध्यान केंद्रित करें।
(१२) फैलोलाइडिन डाई के लिए डिजिटल कैमरे का उपयोग करके डिजिटल छवियों को कैप्चर करें।

परिणाम

जैविक पदार्थ सतह पर कोशिकाओं के प्रसार के साइटोस्केलेटन की छवि निम्नलिखित है।

कोशिका का साइटोस्केलेटन

आभासी प्रयोग

छवि देखने के लिए कृपया निम्नलिखित का चयन करें

कोशिका का साइटोस्केलेटन