सिद्धांत

नैनोसेकंड के भीतर ज्ञात विशिष्ट तरंग दैर्ध्य के साथ प्रतिदर्श के विकिरण के बाद उच्च तरंग दैर्ध्य के प्रकाश के उत्सर्जन को प्रतिदीप्ति कहा जाता है। प्रतिदीप्ति खुर्दबीन नामक एक उपकरण एक ऑप्टिकल खुर्दबीन है जो प्रतिदीप्ति के सिद्धांत द्वारा पदार्थों के गुणों का अध्ययन करने के लिए प्रकाश की एक विशिष्ट तरंग दैर्ध्य का उपयोग करता है। . मोनोक्रोमैटिक प्रकाश का उपयोग उस प्रतिदर्श को रोशन करने के लिए किया जाता है जो फ्लोरोफोर अणुओं को उत्तेजित करता है। ये फ्लोरोफोर अणु विश्राम के दौरान उच्च तरंग दैर्ध्य की कम तीव्रता का प्रकाश छोड़ते हैं जो द्विवर्णी दर्पण और उत्सर्जन फिल्टर से होकर गुजरता है जो उत्तेजना प्रकाश को अवरुद्ध करता है और उत्सर्जित प्रकाश को पारित होने देता है, और उत्सर्जित प्रकाश की तीव्रता को बढ़ाता है। इसलिए, एकल फ्लोरोफोर की उत्तेजना के कारण एक बार में एकल रंग छवि प्राप्त की जा सकती है। अलग-अलग फ्लोरोफोर वाले एक प्रतिदर्श को प्रतिदर्श में मौजूद विभिन्न विशेषताओं को देखने के लिए चित्रित किया जाता है और इन एकल रंगीन छवियों को बहु-रंगीन छवियों को प्राप्त करने के लिए मिला दिया जाता है।

उत्तेजना और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा

(१) उत्तेजना और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा लगभग एक दूसरे की दर्पण छवि हैं।
(२) उत्सर्जन स्पेक्ट्रा उच्च तरंग दैर्ध्य की ओर शिफ्ट हो जाता है।
(३) तरंग दैर्ध्य के बीच के अंतर को स्टोक शिफ्ट कहा जाता है।
(४) उत्सर्जित प्रकाश की तीव्रता आमतौर पर उत्तेजना प्रकाश के 10⁶ गुना होती है।

पूर्वोपाय

(१) फ्लोरेसेंस प्रयोग के दौरान कमरे की रोशनी को बंद कर दें।
(२) प्रकाश की विशिष्ट तरंग दैर्ध्य के तहत फ्लोरोफोर उपचारित प्रतिदर्श को उजागर न करें क्योंकि प्रतिदीप्ति घटना की अवधि 10⁶ - 10⁹ सेकंड के क्रम की है।
(३) खुर्दबीन के शीशा का इस्तेमाल करते समय हमेशा यूवी शील्ड का इस्तेमाल करें।

जैविक अध्ययन में प्रयुक्त सामान्य अभिरंजक एजेंट

अनुप्रयोग

जैविक और जीवन विज्ञान

(१) ऊतक और उनके उप-सूक्ष्म घटकों को देखना और उनमें परिवर्तन करना।
(२) बैक्टीरिया और रोगजनकों का अध्ययन करना और उनमें परिवर्तन करना।
(3) प्रोटीन-प्रोटीन और प्रोटीन-कोशिका अन्योन्यक्रिया अध्ययन।
(४) एक द्वि-परत झिल्ली पर वायरस की गति।
(५) कच्ची दवाएं।

धातु विज्ञान

खनिज, क्रिस्टल, रेजिन, क्लोरोफिल और अकार्बनिक यौगिकों के विभिन्न गुणों को देखना